miRNA PCR
MicroRNA（miRNA）是一類由內(nèi)源基因編碼的長度約為22個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，它們在動植物中參與轉(zhuǎn)錄后基因表達調(diào)控。里來可以針對不同樣本、不同檢測需求提供高質(zhì)量RT-PCR 服務(wù)，利用 莖環(huán)法與加尾法 2套體系選擇開展實驗，結(jié)果可靠，重復性好。
哪種miRNA qPCR檢測方法更適合您？
| 莖環(huán)法 | 加尾法 | |
|---|---|---|
| 檢測方法 | SYBR Green染料法 | SYBR Green染料法 |
| 靈敏度 | 能檢測總RNA量≥10ng樣品中的miRNA表達量 | 準確鑒定總RNA量210ng樣品中的miRNA表達量 |
| PCR步驟 | 特異性PCR正向引物（與miRNA部分序列匹配） | 特異性PCR正向引物（與miRNA全部序列匹配） |
| 特異性 | 最大能分辨僅有一個堿基差別的miRNA | 能分辨絕大部分成熟miRNA |
| 特點 | 特異性強，靈敏度高 特異地檢測較低樣本量中的目的miRNA |
通用性強，節(jié)省樣本 單個樣本可同時檢測大量miRNA及其他類型RNA |
| 反轉(zhuǎn)錄步驟 | 特異性RT引物（每個miRNA需要單獨RT） | 針對Poly(A)化RNA的通用型RT引物 |
常規(guī)檢測流程
基于qPCR 檢測技術(shù)的miRNA表達及差異分析是對測序、芯片結(jié)果的有效補充與驗證，是進一步確定研究對象并做后續(xù)功能研究或生物標志物篩選的基礎(chǔ)。 miRNA需使用專用引物與專用試劑盒，詳情請咨詢。
引物設(shè)計
RNA提取和逆錄轉(zhuǎn)
Real-time RCP
數(shù)據(jù)分析
完成
附錄.如何開展miRNA研究？
去核糖體RNA法富集lncRNA進行鏈特異建庫測序 基因編輯:CRISPR-Cas9 crRNA
文庫
Inc RNA表達差異分析 新IncRNA預測 IncRNA-mRNA 共表達分析 IncRNA功能預測
功能獲得性研究：過表達載體 功能缺失性研究：siRNA,Smart Silencer,ASO IncRNA檢測：qPCR,FISH IncRNA功能驗證RNA pull-down,CLIP-seq,ChIRP-seq,RIP-seq等 基因編輯：CRISPR-Cas9系列及配套產(chǎn)品
構(gòu)建動物模型 導入過表達載體、siRNA或ASO 檢測動物表型變化，生化指標和相關(guān)基因表達
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