Cytotoxicity/proliferation detection
細(xì)胞毒性/增殖檢測(cè)
細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁育和遺傳的基礎(chǔ)，是生物體的重要生命特征。細(xì)胞通常以分裂的方式進(jìn)行增殖。
細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細(xì)胞殺傷事件，不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機(jī)理。
細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)是生物相容性測(cè)試的一種，通過(guò)檢測(cè)材料或者藥物對(duì)細(xì)胞的增殖或者生長(zhǎng)的影響，來(lái)評(píng)價(jià)藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定等。
細(xì)胞毒性/增殖檢測(cè)
MTT法:
MTT即噻唑藍(lán)，是一種可接受氫離子的黃色有機(jī)化合物，可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C等還原為不能溶于水的藍(lán)紫色產(chǎn)物甲臜（formazan）。該產(chǎn)物雖然不溶于水，但可以溶于特定溶劑(如DMSO)。
實(shí)驗(yàn)原理
在特定溶劑存在的情況下，該產(chǎn)物被完全溶解，然后通過(guò)酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)（如570nm）條件下根據(jù)吸光度來(lái)反映細(xì)胞增殖/毒性情況。
結(jié)果判讀
細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。
CCK-8法:
使用的是WST-8(一種類似于MTT的化合物)，它在電子耦合試劑的作用下可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為高度水溶解的黃色甲臜（Formazan）
結(jié)果判讀
細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
方法對(duì)比
| 比對(duì)類別 | MTT | CCK-8 |
|---|---|---|
| 優(yōu)點(diǎn) | 靈敏度較高，價(jià)格便宜 | 1.操作簡(jiǎn)單，避免細(xì)胞計(jì)數(shù)過(guò)程中認(rèn)為因素的影響； 2.CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度； 3.可反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，檢測(cè)時(shí)間靈活，不影響細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)； 4.無(wú)需放射性同位素和有機(jī)溶劑，對(duì)細(xì)胞毒性低； 5.CCK-8產(chǎn)生的Formazan是水溶性的，無(wú)需換液。 |
| 缺點(diǎn) | 操作步驟較多，需要使用有機(jī)試劑，靈敏度不如CCK-8，多數(shù)需要配置，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，細(xì)胞毒性較高。 | 1.價(jià)格較MTT貴； 2.CCK8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，容易漏加或多加。 |
| 實(shí)驗(yàn)用途 | 1.藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測(cè)定； 2.細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測(cè)定。 |
1.細(xì)胞增殖測(cè)定：細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)在很多領(lǐng)域都會(huì)用到，比如腫瘤相關(guān)、損傷后修復(fù)等。 2.藥物篩選：在測(cè)定一個(gè)藥物的毒性和安全有效濃度時(shí)，經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。 3.細(xì)胞毒性測(cè)定：這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對(duì)細(xì)胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對(duì)細(xì)胞的影響上。 4.腫瘤藥敏試驗(yàn)：應(yīng)用最為廣泛。 5.微生物對(duì)細(xì)胞的毒性或增殖的實(shí)驗(yàn)。 |
服務(wù)價(jià)格
| 商品信息 | 貨號(hào) | 單價(jià) | 備注 |
|---|---|---|---|
| CCK8檢測(cè) | LLJ021 | 750元/板/時(shí)間 | 不含細(xì)胞株和受檢藥物。4個(gè)復(fù)孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對(duì)照組，即藥物最多可設(shè)置13組(52-54孔可用)） |
| MTT檢測(cè) | LLJ022 | 650元/板/時(shí)間 | 不含細(xì)胞株和受檢藥物。4個(gè)復(fù)孔（共60孔可以用，但要除去凋零組、對(duì)照組，即藥物最多可設(shè)置13組(52-54孔可用)） |
實(shí)驗(yàn)掠影
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